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紫外分光光度計校正方法

来源:/   作者:紫外可見分光光度計    更新日期:2017-06-22 11:49:29    点击:2205

紫外分光光度計校正方法

 

 

 
  我們知道,分光光度法的最重要的一個物理化學量是吸光度。爲了獲得准確的研究結果,准確測得樣品溶液的吸光度是非常重要的。一般,分析結果的不可靠性與偶然誤差和系統誤差有關。偶然誤差影響測量的精密度,可通過足夠數量測量的統計處理來減少;系統誤差影響測量結果的准確度,可在大體相同實驗條件下,用比較一種物質的准確測量結果,使系統誤差統一起來。而分光光度計的系统误差(波长校正、分光光度計的慢散光、放大器的线性响应、暗电流和比色皿的光程)和操作误差(温度改变、仪器读数、操作者的改变、使用物质的纯度、称量和浓度、pH)对测量吸光度的影响是可以检查和校正的。关于操作误差,多数情况下,通过严格按操作程序测量、仪器调零、准确称量等来控制或减少这种误差的产生。关于仪器的系统误差,可通过对分光光度計的定期校正来克服,若所需准确度很高的测量,则必须天天校正。

 


  校正內容:
  1.波长的准确度试验 以仪器显示的波长数值与单色光的实际波长值之间误差表示,应在±1.0nm范围内。可用仪器中氘灯的486.02nm与656.10nm谱线进行校正。
  2.吸收度的准確度試驗
  3.雜散光的試驗
  4.波長重現性試驗
  5.分辨率試驗

  吸光度的校正方法:

  校正吸光度常用一很純物質一定濃度的溶液爲標准,且此溶液的吸光度系數經不同實驗室核對,爲了使標准液吸光度不受測定波長的微移動而有改變,常選擇具有較平滑吸收高峰的物質,同時要求溶液穩定,且在相當的波長範圍內吸收度的改變符合Beer-Lambert定律,常用硫酸銅、硫酸铵钴和硝酸鈉或鉀的溶液。鉻酸鉀溶液是最常用的標准溶液,此溶液在紫外區和可見區均適用。


  波長或波數的校正方法:

  可用具有窄吸收带的溶液,滤光片或蒸气来校正所需要的光波范围。如果要求很高的精密度时,可用放电灯泡发射的射线来校正。有的光谱仪其上已装有一个为校正用的灯。   苯的蒸气对校正一定范围的波长亦很有用,可用一小滴苯放于一厘米厚的吸收杯中,测其吸收波长,在远紫外区可用氧气的吸收带进行校正。   用各种稀土金属的滤光片,可以很快地校正波长,但准确度不如上述方法高。常用含有钬和钕、镨离子的滤光片。

  雜散光的校正方法

  小量的雜散光往往會引起較大的測量誤差,它的校正可用一個能完全吸收某一波長單色光,且在其他波長吸收很弱的溶液。從這個溶液所表現的透光情況可推測雜散光的近似值。由雜散光帶來的僞吸收帶,亦可用Beer-Lambert定律來檢查,但用此定律檢查僞吸收帶誤差較大。由切斷範圍之外所表現的透射比可得出近似的雜散光百分數。若所含雜散光大于0.1%,應設法減低,或對測得的吸收光度進行校正。由雜散光引起的誤差與雜散輻射成正比,因此校正值很容易從化合物的近于正確的曲線計算而得。此外,還可用一個適當的濾光片,該濾光片在測定波長範圍內完全透光,但吸收此範圍外的光波,由此來消除雜散光。

 

 

 

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